您已經選購
0
樣商品，總價
0
元，會員價
0
元
|
會員登錄
|
會員福利
|
繁體
|
简体
最新訊息
|
品質極致
|
認識我們
|
卓越優勢
|
活動花絮
|
回首頁
中文書籍
中文期刊
一般類
生物科技類
醫學應用類
疾病防制及醫療類
加工技術類
栽培技術類
其他
英文期刊
一般類
生物科技類
醫學應用類
疾病防治及醫療類
加工技術類
栽培技術類
其他
松杉靈芝免疫調節蛋白的構造與作用機制之研究
回前頁
Molecular cloning, expression and site-directed mutagenesis of fungal immunomodulatory protein, FIP-gts, from ganoderma tsugae
林文輝
/
1996
/
國立台灣大學 生化學研究所
靈芝自古為我國吉祥如意象徵，歷代都有關於靈芝的傳說與記載，醫藥學家認為靈芝能治療多種疾病，是滋補強壯，扶正固本的珍貴藥材，至於真正作用機制仍然不很清楚。本實驗室從松杉靈芝 (G.tsugae) 之菌絲體純化出一種免疫調節蛋白質、命名為FIP-gts 經蛋白水解酵素水解後，利用自動胺基酸分析儀 (automatic protein sequencer)，分析其胺基酸序列，可知含有 110 個胺基酸，其序列與免疫球蛋白質重鏈 (variable region of immunoglobulin heavy chain, IgVH) 有很高的相似性。經由Garnier 方法可預測其二級結構，我們利用遺傳工程方法將 FIP-gts 之cDNA 嵌入 PGEX-2T 質體，並置於大腸桿菌中表現，利用 Glutathione - Sepharose 4B 親和性管柱，可純化出含 GST 和重組 FIP-gts的融合蛋白質 (fusion protein)，經由 thrombin 分解後，可得到純化的 FIP-gts蛋白質 ，其刺激人類淋巴球細胞增殖活性與由菌絲體純化之 FIP-gts 相同。 此外，為了探討 FIP-gts 的化學結構與生理活性之關係，故設計多種不同 primers，可構築出不同之刪除 (deletion) 突變蛋白質，其分別為：△N1-3 (刪除第一到三個胺基酸)、△N1-6、△N1-13、△N1-27、△N106-110、△N101-110、△N1-13 / △N101-110、 △N1-27 / △N101-110等，藉由定點突變技術，以及根據 helical wheel program預測，可證實FIP-gts之氮端十三個胺基酸會行成 helix ，若將其刪除則 hydrophobic moment 由野生株之 0.43 降為 0 ，並且喪失生理活性，同時也不再形成 homodimer，而是以 monomer 形式存在。同時若去除氮端第五個 leucine，第七個 phenylalanine，第九個 leucine，其hydrophobic moment則降為0.1，除了會失去 helix 結構外，同時也失去生理活性。故我們可證實FIP-gts 主要生理功能是靠氮端之 helix 形成homodimer，藉由結合到淋
巴球 T 細胞上而產生一連串之訊息傳遞，並促進分泌各種細胞激素來達成免疫調節之功能。
常見問題
|
相關連結
|
合作伙伴
|
網站地圖
|
政策與條款
|
連絡我們
|
靈芝基金會 Copyright ©, All Rights Reserved.
